细胞培养 肝细胞中分离得到的雄性Wistar肝脏 大鼠按文献[14],到collagencoated种子 十二点五平方厘米文化烧瓶(BD生物科学,海德堡, 德国),培养在L - 15培养基 5%小牛血清,L -谷氨酰胺(2毫米),葡萄糖 (3毫米),牛血清白蛋白(1%),碳酸氢钠 (3毫米),庆大霉素(50毫克/升)和地塞米松 (1镑)在37?C在100%的5%加湿气氛 CO2/95%的空气。对于荧光测定,细胞 种在胶原涂层6孔板(BD生物科学)。 播种后两小时,贴壁细胞 洗3次,平衡盐溶液 (HBSS)的新鲜培养基和供应。实验 开始后,细胞的分离20-24魔。 两种大鼠肝内皮细胞系,从肝脏产生 雄性Wistar大鼠,被用于实验。那个 细胞分离后由不同胶原酶灌注 离心和选择性坚持独立 从肝细胞和枯否细胞的内皮细胞。 这些细胞培养在1640培养基 与小牛血清(20%),L -谷氨酰胺(2毫米), 青霉素和链霉素(50 U / ml的50 LG电子/毫升,分别为), 和地塞米松(1马镑)。培养细胞被 由内皮细胞的电子显微镜确定示范 对筛板小学文化。亚文化 ,得到了胰蛋白酶消化。对于实验中, 细胞分裂到1:3和胶原涂层5种子, 平方厘米培养瓶或6孔板。这些细胞被用来 7天的实验后,传代。本 时,细胞中的融合状态