物理化学相关文献数据

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三大文献检索数据库是以下三个：　　1、SCI(科学引文索引 )：(Science Citation Index, SCI)是由美国科学信息研究所(ISI)1961年创办出版的引文数据库，其覆盖生命科学、临床医学、物理化学、农业、生物、兽医学、工程技术等方面的综合性检索刊物。　　2、EI(工程索引 )：(EngineeringIndex，EI),1884年创刊，由美国工程信息公司出版，报道工程技术各学科的期刊、会议论文、科技报告等文献。　　3、ISTP(科技会议录索引 ) 是世界著名的三大科技文献检索系统，(Index to Scientific & TechnicalProceedings，ISTP)，也是由ISI出版，1978年创刊，报导世界上每年召开的科技会议的会议论文。

美国《科学引文索引》(SCI-E)；美国《化学文摘》(CA)；日本《科技文献速报》(JICST)；俄罗斯《文献杂志》(AJ)。《中国科技论文与引文数据库(CSTPCD)》(中国科学技术部中国科技信息研究所主办)；《中国学术期刊(光盘、网络版)》(清华大学主办)；《中国学术期刊文摘》(中国科协和国家自然基金委主办)；《中文科技期刊数据库》(科技部西南信息中心主办)；《中国学术期刊文摘》；《中国生物学文摘》(中国生物学文献数据中心主办)；台湾华艺CEPS中文电子期刊。

生物药物相关文献数据

入会文秘乐园，可下天下文章

国际医学文献数据库检索网站Medline——世界上最著名的医学文献检索系统之一AIDS Databases——有关艾滋病的临床实验、药物研制以及相关文献数据库CANCERLIT——癌症数据库(National Cancer Institute)CHID online——综合卫生信息数据库，提供有关卫生、卫生教育资源的题录、文摘等信息ClinicalTv——向医患人员提供的临床实验信息数据库DIRLINE——收集美国约17,000个政府机构、研究机构、公司、学术机构等信息药物信息库——包含有9,000余种美国处方与非处方药物信息HSTAT——包括有健康指南、评价、和消费者指南信息的全文数据库NCCAM Resources——补充和替代医学资源Dietary Supplements——提供维生素、矿物质、植物等信息畸形、智力迟缓数据库——提供先天畸形、智力发育迟缓信息LOCATORplus——杂志、书籍和视听教材目录数据库Chemical Abstract——覆盖化学、化工、医学、生物学、环境、食品等多学科的科技文献系统Dialog 联机检索系统——世界上最大的文献检索系统Biomedicine——荷兰医学文摘，世界权威性的医药文献数据库。RHO——生殖健康展望，由William H Gates 基金会的基金资助Out Look——有关生殖健康的论题，由 PATH 出版，联合国人口基金资助，可免费索取医药信息网——有药品数据库、疾病数据库、新药数据库、医药市场等主要数据库MEDLINE Search——最权威的生物医学文献数据库，可获取全球范围内的4300种期刊的文献Consensus Statements——提供对医生、患者有重要意义的有争议医学问题一致性见解Cancer net Database——综合癌症信息数据库Rare Diseases Database——罕见疾病临床研究数据库Visible Human Project——可视人计划数据库TOXNET Databases——毒理学数据库，将有关毒理和有害物质信息分为八个文档FDA——最新的有关食品、药物、生物制剂、美容品、医学装置等通过、调整等信息Guideline Clearinghouse——提供临床医疗指南，汇总美国各权威协会和学术机构制定的各种指南性文件Women's Health & Environment——妇女卫生与健康研究信息数据库Rehabilitation Information——康复信息数据库INFOTRIEVE——可通过WEB浏览器查找医学文献CLINIWEB——医学信息检索系统，帮助医生从WEB上查询有用的医学信息Health A to Z——一个功能强大的INTERNET医学信息资源搜索器Medguide——收录了网上大部分生物医学资源，支持多词逻辑检索achoo——INTERNET医学信息资源搜索MedAll List——是哈佛大学收集医药网点的列表，有大量网上医学院校和图书馆的联接MedExplorer——检索方法简便，主要提供有关医学新闻及杂志的信息MEL health resources——将INTERNET上的医药信息按学科分类进行整理，提供关键词查找Medical Virtual library——是一个分布式的资源系统，提供关键词查找，并有按字序排列的列表BiomedNet——由美国多家机构联合建立，收集网页1万余个Medscape——面向临床医师和其他医疗卫生专业人员的交互式的商用Web站点Medical Matrix——有分类检索和关键词检索两种检索方式。还提供免费Mailing listsDoctor's Guide——向医生和患者提供信息和服务，特色服务是新闻和会议消息美国化学文摘社——世界最大、最强化学信息库,1300万条摘要、1650万种物质美国专利数据库——提供美国专利目录和摘要数据库,免费查找专利名称、摘要等信息天然产物数据库——提供75年以来活性天然产物，通过电子邮件申请帮助查询IBM 专利服务器——提供美国专利局26年来的专利摘要，免费摘要、付费定购拷贝件Science 科学——世界订户最多综合性科学刊物，这是我国引进的电子版PharmInfoNet——医药信息网，提供药品、疾病、新药数据库；医学专题综述、医药市场等Nature Medicine——自然杂志出版生物医学论文，提供1996年以来各期目录及摘要The Lancet 柳叶刀——始于1823年著名医学杂志，提供大量全文，全部免费阅读')美国国家健康研究所——联邦政府生物医学研究中心，世界上著名的生物医学研究中心HealthGate数据公司——提供免费Medline查询，最新研究信息，帮助临床治疗、生物医学研究及教育生物医学文献数据库——中国医科院信息研究所研制，综合性生物医学数据库，国内权威美国医学协会出版物——美国医学协会出版，新闻、文摘或全文，包括以下部分。内科学文卷、皮肤病文卷、外科学文卷、眼科学文卷、美国医学会志、美国医学新闻、神经病学文卷、妇女健康杂志、家庭医疗文卷、普通精神病学文卷、耳鼻喉、头颈外科、儿科及青春期医学British Medical Journal——英国医学杂志Medical Conference——医学会议库，4500多条会议信息，每日更新NIST Webbook and Chemistry Webbook——美国国家标准与技术研究所数据集，免费查询5000多种化合物的红外光谱，8000多种化合物质谱等等。New England Journal of Medicine——报道医学重要研究成果的周刊，提供全部过刊信息及现刊的论文摘要国内医学文献数据库检索网站中国科技信息资源共享网络——涵盖中国生物医学文献数据库（CBM）、美国MEDLINE数据库中国科学引文数据库——集多种功能为一体的综合性文献数据库中国科学引文索引数据库——收集我国出版315种重要期刊，91-94年13万篇论文及45万引文摘要。中医中药数据库——中国科学院科学数据库提供中国中医药文献检索中心——由中国中医研究院信息中心制作，提供中医药方面的Web界面文献检索服务金纬达海峡信息数据库检索——包括动态信息、科技类、综合类以及台湾系列信息等六十五个数据库万方数据医学期刊——由中国科技信息研究所制作，收录了近百种医学期刊的电子版，免费使用医管论文(台湾医院协会)——收有台大医学院,阳明医学院,高雄医学院,中国医药学院论文若干中国专利数据库——中国知识产权局研制，提供85年专利法实施后批准的专利，收集我国出版315种重要期刊，91-94年13万篇论文及45万引文摘要中医药期刊文献数据库——收集我国出版315种重要期刊，91-94年13万篇论文及45万引文摘要海峡信息数据库检索——中文网上科技文献检索中国医学信息网络——栏目有中国卫生事业，中国生物医学文献数据库，中医学院，协和医科大，医学信息网，亚洲桥，Internet信息查询中国卫生事业——有卫生事业概况、中国生物医学文献数据库、中国医学科学院、医学信息网络、医药卫生机构等栏目中国生物医学文献数据库——收录了1982年以来近千种中国生物医学期刊以及会议论文的文献题录

您好，很高兴为您解答。一．检索途径和方法 CBMdisc数据库中使用的布尔逻辑运算符一般有“AND”、“OR”、“AND NOT”，通配符：“?”，可替代任何一中文字符，例如：张？、张伟？。范围运算符：仅用于出版年字段的检索，对检索结果进行时间限定。＝（等于）例PY = 2001 检索2001年发表的文献；＞（大于）例PY > 1998 检索1998年以后发表的文献；＜（小于）例PY < 1997 检索1997年以前发表的文献；＞＝（大于等于）例PY >= 1992 检索1992年以来（包括1992年）发表的文献；＜＝（小于等于）例PY <= 1990 检索1990年以前（包括1990年）发表的文献。 CBMDisc提供了5种检索途径，即基本检索、主题词检索、索引词检索、分类检索和期刊检索。 1．基本检索可直接在检索框内输入有效检索词进行单字、文本词的检索，只要文献记录中出现与检索词相同的实义词，系统一律检出。 ⑴ 在基本检索状态下，可进行以下一些辅助检索： ① 缺省字段：系统默认字段，表示在中文题目、文摘、作者、主题词、特征词、关键词、期刊字段查找用户输入的检索词。 ②全部字段：表示在所有可检索的字符型字段中查找用户输入的检索词。这种检索方式可使检索结果较全。 ③特定字段：指仅在某一指定字段内检索用户输入的检索词，如中文标题、英文标题、作者、地址、期刊等。特定字段检索需在检索词前后加字段标识符，“标识符”表示精确检索，“in 标识符”，表示对所选字段的任意片段进行查找。例：“au ＝李平”，为精确检索，检出的结果均为作者“李平”发表的文章; “李平 in au”，为非精确检索，在作者字段中有“李平”或“李平贵”的文献均被检出； ④引文字段：通过“参考文献”字段可了解某种文献被引用情况。例：查找“吴孟超”发表论文或著作被引用的情况，方法是：在“缺省“下拉菜单中选择“参考文献”字段，输入“吴孟超”，点击“检索”即可显示作者文献的被引用结果。再点击“显示”按钮进入引文题录界面。 ⑵ 各按钮作用及使用方法 ①“显示”按钮显示光标指向的检索式的检索结果。 ②“删除”按钮删除无用的检索式。 ③“选中”按钮用鼠标单检索式，然后点击“选中”按钮，该检索式呈浅蓝色。然后选择“AND”、“OR ”、“NOT”按钮进行逻辑运算。如果想取消选中状态，再点击“清除”按钮，此时，检索式浅蓝色标记消失。例：肝炎治疗首先在检索框内分别输入肝炎和治疗，在检索结果式列表中，点击肝炎检索表达式，然后点击“选中”按钮，接着点击治疗检索表达式，再点击“选中”按钮，被点击后的两个检索表达式均呈浅蓝色，最后点击“AND”按钮将二者组配，即可得到肝炎治疗的文献。 ④“二次检索”按钮可在第一次检索结果的基础上进行二次检索，或重新检索。检索方法与一次检索相同。在二次检索屏幕，系统显示一次检索所使用的数据库、字段、检索式，以及一次检索的命中篇数。可在一次检索的基础上进行限制检索，可浏览检出文献题目。提示注意：“加入列表”和“检索列表”一般用于检索结果中的任何字段内容（如标题、文摘、关键词等）。使用方法：即在检索结果显示文献中，用鼠标选中被检索词（呈浅绿色），然后点击“加入列表”按钮，接着点击“检索列表”，此时被检索词自动添加到检索列表式中，进行限定检索。 ⑶ 关键词检索适用范围： ①不太熟悉规范的主题词时，可先输入关键词，再在显示记录的主题词字段中找到相应的主题词，进行更系统，更全面的检索。 ②没有相应的主题词，包括：A 新出现的科技术语，新发现的物质及疾病名称： B 某些特写概念，如体重、海拔、高度、剂量等：C 中医药名称； ③在使用主题词不能检出满意的文献时，采用自由词，可能会扩大检索结果，并可根据记录中显示的主题词，比较使用的主题词是否合适或重新确定主题词。 2．主题词检索 CBMDisc主题词表收录了美国国立医学图书馆《医学主题词表》（即MESH）和中国中医研究院出版的《中医药学主题词表》的所有词条。医学主题词表是对生物医学文献进行主题分析、标引和检索时使用的权威性词表，它的作用是使医学文献的主题标引达到统一和一致，并指导用户高质量地检索医学文献。在基本检索页面点击“主题词”按钮进入主题词检索页。可选择中文主题词或英文主题词两种查找方式，在输入框键入主题词后点击“浏览”按钮进入主题词树形结构页，可根据系统显示的同义词、相关词、上位词或下位词进行检索，选择主题词后可对该词进行扩展检索、加权检索及主题词与副主题词组配检索。例1: 阿司匹林诱发哮喘本课题包含两个主题概念，即阿司匹林和哮喘，按照MESH标引规则，应查同时包含“阿司匹林/副作用”与“哮喘/化学诱导”两方面内容的文献。步骤如下： ⑴ 在“中文主题词” 对话框下输入 “阿司匹林”，点击“浏览”按钮，再点击“主题词注释”进入阿司匹林的英文名称和树形结构页；在检索选项中选择“扩展”或“不扩展”；再点击“检索”；这时出现副主题词对话框，根据课题要求，用户可选择相匹配的副主题词。本检索选择“副作用”，点击“确认”按钮。 ⑵ 采取以上方法，在“哮喘”主题词下, 选择“化学诱导”副主题词。 ⑶ 将以上两个检索结果分别“选中”，点击“AND”则显示最终检索结果。例2：肺癌的诊断 “肺癌”这个词不是规范的主题词，因此输入之后，轮排词表中没有显示，只有“小细胞肺癌”，这个范畴显然太小了，要转换成相应的主题词“肺肿瘤”之后，再进行检索。在出现肺肿瘤树状结构状态下，进行扩展检索，选择全部的扩展树，可将“肺肿瘤”的全部下位类如支气管肿瘤、支气管原癌、PANCOAST综合征等内容的全部文献进行扩展检索，再与副主题词“诊断”组配。可选择“E英文检索主题词”，输入Lung neoplasms，在英汉对照主题词轮排表中，按字顺找到Lung Neoplasms＝肺肿瘤，点击“检索”，选择“诊断”或“超声诊断”等相关副主题词后确定，即得检索结果。 CBMDisc主题词表与MESH词表完全对应，因此当读者不知某个主题词的英文拼写时，可通过CBMDisc主题词表的主题词注释，找到其正确的英文主题词，进而检索英文数据库。还可通过显示文献的英文题目（TT），找到对应于某个中文词的英文表达方式。从理论上讲，主题词检索有助于提高文献的查全率和查准率，应是最理想的检索途径，但CBMDisc在标引深度、标引的准确性、一致性等方面，都不及MEDLINE，其主题词检索效果往往不及自由词检索来得全。 3．索引词检索索引词表收录了数据库中所有可检索字段中的所有单个字和部分词组, 以及主题词、汇编名称等，该表有助于用户通过浏览方式选词检索。检索方法：点击“索引”按钮，在提问框中输入检索词，点击“浏览”按钮或按回车键，系统显示索引词表；包括索引词，命中记录数和索引词的出现数；点中一个索引词（呈浅蓝色），然后点击“检索”按钮。索引词表检索仅在默认字段进行，即：题目、文摘、关键词、主题词和刊名字段。表中列出的命中文献数为所有字段的检索结果。 4．分类检索点击“分类”按钮，系统进入分类检索状态。分类表包括《中国图书资料分类法》第三版R类的内容，其排列规则为：总论复分表排在最前面，标记符号为“-”，其次是临床专用复分表，标记符号为“0”，即01-09，分别表示预防控制、病理学、医学免疫学、诊断学、治疗学等复分类目；最后是主类号，即R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9的全部类目。可以通过“分类号”和“分类词”进行检索或选用复分号进行扩展检索。 5．期刊检索点击“期刊”按钮，系统进入期刊检索状态。期刊检索可从刊名、出版地、出版单位以及主题词途径等进行检索。方法：在期刊检索输入框输入刊名等检索词，点击右侧的“浏览”按钮，屏幕显示有关期刊列表,即有关的刊名和出版单位；欲浏览期刊信息，方法1：可直接点击刊名，进入期刊显示屏幕。该屏详细显示期刊全部信息，如国际期刊代码、国内期刊代码、期刊内部代码、邮发代码、创刊年、主办单位地址、邮编、电话、期刊变更注释、以及主题词、分类号等内容。方法2：点击“词条注释”按钮，显示该期刊主编、编辑单位、编辑部电话、地址、邮编、刊号等内容，可作为投稿信息。 6．主题词与副主题词组配检索主题词与相应的副主题词进行组配检索。副主题词包括MESH词表中的82个副主题词和中医药主题词表中的10多个中医药方面的副主题词。 7．其它组配检索在实际检索过程中，可根据课题需要进行各种组配检索。如主题词与自由词组配检索，主题词和著者组配检索，关键词和期刊组配检索，著者和期刊组配检索等等。下面举例说明主题词和自由词检索。例：急性心肌梗塞的治疗分析：“心肌梗塞”有相应的主题词, 属于治疗方面的副主题词有：饮食疗法,药物疗法, 外科学, 放射疗法,中医药疗法, 按摩疗法, 穴位疗法, 针灸疗法,中西医结合疗法, 气功疗法等可与之组配, 但没有“急性心肌梗塞”这个主题词, 因此用自由词“急性”来限定。检索步骤： ⑴ 在“主题词”状态下输入“心肌梗塞”（Myocardial Infarction），点击“浏览”按钮或按回车键，双击被检索词，扩展检索，然后点击“检索”按钮，进入选择副主题词界面，用户可根据需要用鼠标选中左边副主题词框的副主题词（呈浅蓝色），或按下Ctrl键选择多项副主题词，点击“添加”按钮，把选中的副主题词添加到右边的选中副主题框里，再点击“确认”按钮，可将选择的副主题词（框）与之组配限定； ⑵ 在“检索”状态下输入关键词“急性”，点击“检索”按钮； ⑶ 再将以上两个检索结果表达式分别“选中”，点击“AND”按钮将二者组配，即可得到最后的检索结果。二．检索结果显示、标记、套录 ⑴ 显示用鼠标双击检索表达式或单击“显示”按钮，即可显示该检索结果文献的题录，文献浏览格式有题录和文摘格式选择，一般系统默认题录格式，只要点击“题录格式”按钮便切换到文摘格式。 ⑵ 标记在浏览状态下可对相关文献进行标记，标记时只需用鼠标点击选中文献左上角书本图标，该条记录左边即显示一列红色星号，再点击红色星号便取消标记。标记后点击“显标注”按钮，即可对标记记录和全部记录进行选择浏览。 ⑶ 套录选中标记后，点击“套录”按钮，弹出套录窗口，点击“套录参数”按钮逐项选择“确认”后，进行选择相应文本框内输入存盘路径、文件名及存盘的文献类型等，即把命中文献存盘。点击“追加”按钮，可将多次检索标记的文献存入同一文件名下。 ⑷ 打印在选中标记后，点击“打印”按钮，弹出打印窗口，点击“打印参数”按钮逐项选择“确认”后，最后按“打印”按钮即可进行打印。数据库检索完毕后，直接点击页面右上角“╳”符号即可。如若满意，请点击右侧【采纳答案】，如若还有问题，请点击【追问】希望我的回答对您有所帮助，望采纳！ ~ O(∩_∩)O~

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可上CA、medline进行检索

食物的微生物污染是影响食品安全的重要因素之一,在其贮藏与加工过程中,快速、准确地检测食物微生物污染,是控制和保障食品安全的重要手段。目前,对于食品中大肠菌群的检测,国内多数采用的检测方法是依据中华人民共和国国家标准(GB1~31-94)和中华人民共和国国家质量监督检验总局的《食品卫生微生物学检验-大肠菌群的快速检测》(GB/T32-2002)。其中国标法检测结果的准确性、灵敏性均较高,但是操作繁杂、耗时较长,不适合于保质期短的食品检测;尽管快速检测国标法大大缩短了试验周期,操作也相对较易,但仍然需要使用大量玻璃容器和仪器,不便于现场操作。3M试纸快速检测方法由于前处理简单,处理时间短,在生产加工企业的现场检测中具有较大优势,但是其检测效果和检测限量是否达到国家规定的食品卫生标准还有待证实。对此,笔者进行了3M试纸的大肠菌群检测法与国家颁布检测标准方法的试验对比研究,并采取大肠菌群污染的自然状态未知浓度和模拟培养已知浓度的两种比较,以期为食品贮藏、加工过程的卫生质量控制应用研究提供基础依据。

pubmed，NCBI找文摘（也有免费的全文，较少），看到需要的，有意向读全文的，在文献论坛求助如丁香园、龙王学术、小木虫、博研联盟、萍萍家园求助，也可以通过馆际互借

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额。。。楼上的各位实在都太不靠谱了。。看来拿分的只能是我了。。。。跪谢楼上各位大大的不精彩答案啊

微生物前沿、生物过程、计算生物学、生物医学……这些

您到中国知网里面有全部的论文库，全文的，可直接注册后下载，祝您愉快！　　我帮您下载了一篇很短的，不知道是否对您有用，其他的可看参考资料后自行下载哦。科技传播杂志吴卓颖编辑，有其他需要咨询的可直接加我。祝您好运哦！　　临床微生物检验的快速诊断技术研究进展　　关键词：分子生物来源： CHKD期刊全文库《当代医学》2099年第16期　　（本文作者：解放军第二五二医院李苏利）　　目前感染性疾病仍然是危害人类健康的重大隐患。随着新发和突发感染性疾病的涌现，曾已被控制的感染性疾病的卷土重来，造成感染性疾病的微生物种类日益复杂，常见的病原微生物的威胁不仅没有消除而且出现了大量耐药菌株，加上新的病原微生物的出现，给临床诊断和治疗带来了极大的困扰。严峻的现实给病原微生物的检测和诊断提出了更高的要求。世界卫生组织(WHO)对临床微生物实验室提出:临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断方面。利用一切手段将实验室数据转化为临床有用的信息。　　1 自动化鉴定技术的应用　　临床微生物的实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，尤其是分离培养，目前仍然是许多病原体检测的“金标准”。但是，由于细菌的生长繁殖需要一定时间，使检测周期难以缩短。此外，很多病原体的培养受营养要求、抗生素应用及病原体含量等因素的影响，用传统人工方法操作复杂、检测周期长，敏感性与特异性也有限。为解决这一问题，各种自动化培养和鉴定系统不断产生，随着计算机的发展和应用，先后出现了许多自动与半自动细菌鉴定与药敏系统，统称为“微生物鉴定专家系统”，这些系统大大提高了临床实验室的工作效率和检测的准确性，传统鉴定方法也在逐步改进，并在一定程度内加快了检测速度。　　2 免疫学方法　　免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应，检测病原微生物，简化了病原微生物的鉴定步骤，备受关注。各大文献数据库提供的数据显示，几乎建立了所有病原体的血清学检测方法，表明该方法已成为一种微生物实验室常用的成熟的检测技术。　　1 凝集技术常用的凝集技术有乳胶凝集技术和血清凝集技术。用于微生物的初步诊断、分型、鉴定，例如霍乱弧菌和志贺菌的分型，大肠杆菌O57：H7、脑膜炎球菌等，短时间内就可完成鉴定。该诊断法具有操作简便、快速、准确、特异性强、阳性率高等特点。　　2 荧光抗体技术荧光抗体技术是根据抗原抗体反应具有高度的特异性，把荧光素作为抗原标记物，在荧光显微镜下检查呈现荧光的特异性抗原抗体复合物及其存在部位。荧光抗体技术的主要特点是特异性强、速度快。吕治林等报道由美国同行所作的用炭疽杆菌细胞壁(CW-DFA)和荚膜抗原(CAP-DFA)特异的荧光标记的单克隆抗体，可快速鉴别炭疽杆菌。　　3 酶免疫技术酶联免疫技术现已被广泛地应用于多种病原微生物的检测，可检测样本中病原体抗原，也可检测机体中的抗体成分。应用单克隆抗体结合硝酸纤维膜上的斑点ELISA技术，已成功地自患者的咽拭标本中同时检出可能存在的肺炎支原体、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒。Gehring等用酶联免疫化学发光法(ELIMCL)测定大肠杆菌O57：H7。许多疾病的检测都已有商品化的试剂盒出现。　　3 分子生物学技术　　随着分子生物学技术的迅速发展，使人们对微生物的认识从外部表型逐渐转向内部基因结构特征，微生物的检测也从生化、免疫方法转向基因水平检测，对于那些难培养和不可能培养的微生物，可直接通过获得基因信息，给微生物学的检测带来崭新的领域，为科学快速发展提供了新的机遇。　　1 PCR技术 PCR具有高度敏感性和特异性，在病原体检测上，对形态和生化反应不典型的微生物鉴定，常规方法常难以准确检测，即使出现大量死菌PCR也能做出准确的鉴定；不受混合标本的影响，可轻易从含有大量正常菌群的标本中鉴定病原菌；对于生长缓慢或难于培养的微生物鉴定，如分枝杆菌、幽门螺杆菌、支原体、衣原体、螺旋体等，目前其他方法阳性检出率很低，PCR技术对这类菌株的鉴定有重要意义。　　但是常规PCR技术也存在一些问题，如出现假阳性、形成引物二聚体，检测操作也比较繁琐，中间污染环节多，易出现假阳性或假阴性结果。为了克服这些不足，一些新的PCR技术渐衍生出来并被用于实践，如巢式PCR、逆转录PCR、多重PCR、通用引物PCR(UP-PCR)、PCR单链构象多态性分析、随机引物DNA多态性扩增(RAPD)、限制性长度多态性分析(RFLP)、实时荧光定量PCR等。　　2 基于16S rRNA与GyaB的检测技术　　1 以16S rRNA为靶基因进行检测 16S rRNA存在于所有原核生物细胞中，它们相对稳定且有较高的拷贝数，其序列中含可变区及高度保守区，因此可设计群、属、种特异性的探针。现阶段各种常见细菌的16S rRNA基因几乎全部测序完成，16SrRNA编码基因的这些特点使之成为较理想的细菌基因分类的靶序列，逐渐成为细菌鉴定、分类的“金标准”。　　2 以促旋酶(g yras e)B亚单位基因靶基因进行检测GyaB除了具有16S rRNA所具有的优点外，其基因进化率高于核糖体基因，还有GyaB在近乎全部细菌中呈单拷贝形式。有研究表明，基于GyaB序列构建的进化图谱与基于DNA-DNA杂交的相一致。因此，GyaB的分析特别适合于菌株的区别和鉴定。Fukushima等以GyaB基因为靶基因设计基因芯片来检测分枝杆菌属，实验结果显示此芯片鉴别分枝杆菌达到种水平，并且能区别密切相关的菌种，这对临床治疗具有重要的参考价值，说明分析GyaB基因序列对于在菌种水平鉴别细菌是快速而有效的方法。　　3 多位点序列分型多位点序列分型(MLST)是近年来发展很快的分子生物学分析方法，具有很高的分辨能力，既适于分子流行病学研究，也可用于分子进化学的研究。MLST越来越多地被作为能进行国际间菌株比较的常用工具，建立一种更为准确的分析系统方法，并且用于研究出现的不同的抗生素抵抗株，相关特殊基因型及新的变异株引起的疾病流行病学分析和种群结构的研究。　　4 环介导等温扩增技术(LAMP) 环介导等温扩增技术(LAMP)，是近年来发展出的一种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传统方法相比，不需要热循环为等温扩增，且由于反应中产生大量的副产物-白色焦磷酸镁沉淀，扩增产物可不经过电泳，通过肉眼观察或浊度计即可判定结果。因此LAMP是一种不需要热循环仪、肉眼即可判定结果的高度特异和敏感的DNA扩增方法。该法针对靶基因的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换聚合酶在恒温条件(65℃左右)保温约60min即可完成核酸扩增反应，扩增出特征性梯状条带。还可通过设计两条环引物可使反应速度提升1/2～1/3。LAMP技术可用于病原微生物的现场快速检测、战时野外及基层普及应用。　　4 分子生物传感器　　分子生物传感器是将新兴的传感器技术和分子诊断技术相结合而成的一种新技术，是现代临床诊断发展的一个新方向。由于生物传感器检测准确、操作简便等特点，近年来已经在许多领域取得了很大的进展，在感染类疾病诊断、药物筛选、未来战争生物战剂监测等领域获得了广泛的应用，其中临床中用于病原体检测的以DNA生物传感器最为常见。华裔科学家陈建柱最新制成的生物传感器，仅需20s时间即可检测出微量SARS病毒、天花病毒及炭疽杆菌等的存在，从而达到早期诊断的目的。　　5 基因芯片　　基因芯片是高通量的群体指标分析系统，基因芯片技术是一项全新的技术，它以一次性检查上万个基因的优势，被誉为是基因功能研究中最伟大的一项发明。它以许多特定的寡核苷酸片断或基因片断作探针，有规律地排列、固定在诸如硅片、玻璃片、尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵，以达到一次试验同时检测多种疾病或多种样品的目的。基于高通量、微型化和平行分析的特点，基因芯片在微生物病原体检测、种类鉴定、功能基因检测、基因分型、突变检测和基因组监测等研究领域中发挥着越来越重要的作用。目前，许多细菌、病毒等病原体的基因组测序已经完成，将许多代表各种微生物的特殊基因制成1张芯片，经反转录就可检测样本中有无病原体基因的表达及表达水平，由此判断病人感染病原、感染进程以及宿主反应等，这样就大大提高了检测效率。　　6 蛋白指纹图谱技术　　蛋白质指纹图谱技术是随着蛋白质组学兴起的一种新技术。近年来，越来越多的学者意识到有必要从蛋白质水平来研究微生物。蛋白质是细菌功能的执行者，细菌种类繁多，不同的蛋白种类决定细菌千变万化的功能和特征。1996年，Clayin等采用MALDITOF MS质谱成功鉴定了革兰阴性和革兰阳性细菌，表明不同属种的细菌具有不同的蛋白指纹图谱，同一种细菌具有相似的蛋白指纹图谱，根据细菌蛋白指纹图谱可对细菌进行快速鉴定。中科院微生物所唐宏研究员等利用“蛋白质质谱指纹图谱”最新技术及其检测办法，可以分析得出SARS与非SARS病人血清中的蛋白质成分变化。这种检测SARS病毒方法经北京天坛医院临床证实，阳性率接近95%，特异性将近96%，能在病人发烧的第一天即可以得出满意的检测结果。有专家称蛋白质指纹图谱技术标志着一种划时代的诊断模式的诞生。　　随着计算机技术的不断发展，临床病原菌检测将向着高度自动化和开发简便的快速检测技术两个方向发展。分子生物学技术通过自动化仪器的使用，将在病原菌诊断、鉴定和耐药基因检测方面发挥巨大的的作用。随着多学科交叉时代的到来，最终将彻底改变临床病原菌检测的现状和传统观念，实现高效高质、快速统一。